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基因扩增检测实验室技术人员能力提升培训班考试题
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（总分100，考核时间120分钟）
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您的姓名：
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单位名称：
一、单选题：（60题，1分/题，共60分）
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1.对于一般的核酸扩增实验室操作人员有较高要求，需要取得（）上岗证。
A.PCR
B.病原微生物实验室
C.大型仪器
D.以上均是
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2.关于扩增反应管的使用正确的是（）
A.透明0.2ml透明管适用于所有96 孔板式实时荧光 PCR仪
B.白色0.2ml不透明管适用于所有96孔板式实时荧光PCR仪
C.上机时扩增反应管每次均应从A1号位开始，按顺序放置
D.上机前必须检查扩增反应管是否完全盖好
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3.一般的核酸扩增实验室设置原则是∶各区独立，注意风向，因地制宜和（）
A. 防止污染
B.方便工作
C.整齐有序
D.以上均不是
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4.以 mRNA为模板合成 cDNA 的酶是（））
A.DNA 连接酶
B.TagDNA 聚合酶
C.末端转移酶
D.RNA 酶
E.反转录酶
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5.二级防护屏障是通过（）的特殊设计，达到对实验室外环境的生物安全保护，防止实验室以外的人员、环境暴露于从实验室偶然逃出的微生物。（）
A.实验室设施
B.实验室设备
C.实验室质量管理
D.以上均是
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6.试剂盒中的标准品和质控品应保存在（）
A.试剂储存和准备区
B.标本制备区
C.扩增区
D.产物分析区
E.缓冲间
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7.一般的核酸扩增实验室可以不用缓冲间的是哪个区? ( )
A.试剂准备区
B.样品制备区
C.基因扩增区
D.产物分析区
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8.如果采用全自动核酸提取扩增仪，实验室至少需要分几个区? ()
A.试剂准备区，样品制备区，扩增区，产物分析区
B.试剂准备区，样品制备区
C.试剂准备区，样品制备区，扩增区
D.试剂准备区，样品制备区，产物分析区
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9.性能验证的 5W1H指什么（）
A. Why, When, What, Where, Who,How
B.Why, When, Which, What, Where, How
C.Why, Would, What, Where, Which, How
选项40
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10.新型冠状病毒的核酸类型是（ ）
A.双链 RNA
B.单链正链RNA
C.双链环状 DNA
D.单链 DNA
E.单链负链RNA
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11.以下哪种说法正确（ )
A.检验项目性能验证可由厂家技术支持或实验室检测人员完成
B.当实验室有多套设备进行试验时，应分别进行性能验证
C.当实验室有多套设备进行试验时，仅需对其中一套进行性能验证
D.室内质控和室间质评可以替代性能验证
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12.阴性质控品失控的原因不包括（ )
A.扩增产物污染
B.标本交叉污染
C.放射性污染
D.基因组 DNA 或质粒的污染
E.试剂污染
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13新冠病毒样本的采集操作穿戴个人防护装备错误的是: （ ）
A.防护服
B.1层乳胶手套
C.护目镜
D.N95口罩
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14.对于PCR定性检测项目进行性能验证时不需要检测（ ）
A. 方法符合率
B. 分析特异性
C. 线性区间
D. 检出下限
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15.关于新型冠状病毒的特点，下列说法错误的是（ ）
A. 病毒对热敏感
B. 56℃15分钟可有效灭活病毒
C. 75%乙醇、含氯消毒剂、过氧乙酸和氯仿等脂溶剂均可有效灭活病毒
D. 氯己定不能有效灭活病毒
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16 . 新冠病毒核酸检测过程中产生废液废物在拿出实验室之前必须( )
A. 消毒
B. 彻底灭菌
C. 消毒剂处理
D. 75%酒精喷洒
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17 . 退火温度是决定PCR反应特异性的关键因素，通常退火温度为 ( )(单项)
A. Tm
B. Tm减3℃
C. Tm减5℃
D. Tm减10℃
E. Tm加5℃
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18 . 临床检验分析质量参数中的变异系数CV是指：( )
A. 不精密度
B. 不准确度
C. 系统误差
D. 不正确度
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19 . 荧光定量PCR检测核酸量的时间段在( )
A. 非指数期
B. PCR反应的最初阶段
C. 指数期的终末阶段
D. PCR反应最后的时间段
E. 指数期的起始阶段
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20 . 循环阈值与起始拷贝数的对数成 ( )
A. 正比例线性关系
B. 反比例线性关系
C. 无关系
D. 互为相反数
E. 曲线相关关系
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21 . 如果需要吸取100µl的液体，最好使用以下哪个型号加样器：( )
A.5~50µl
B.10~100µl
C.20~200µl
D.100~1000µl
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22 . 以下哪项不是培训考核的方式: ( )(单项)
A.笔试
B.操作
C.网上考试
D.问卷
E.提问
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23 . 次氯酸钠去除临床分子生物学实验室污染源的原理是( )
A．诱导同一DNA链上相邻的两个嘧啶之间形成嘧啶二聚体
B．氧化损伤核酸
C．水解核酸
D．与扩增产物的嘧啶碱基形成单加成环丁烷衍生物
E．与胞嘧啶形成羟氨基胞嘧啶
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24 . 聚合酶链式反应是一种( )
A. 体外特异转录RNA的过程
B. 体外翻译蛋白质的过程
C. 体外特异转录DNA的过程
D. 体外特异复制DNA的过程
E. 体内特异复制DNA的过程
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25. 实时荧光PCR仪温度系统校准指标不包括( )
A. 孔间均一性
B. 升温速度
C. 降温速度
D. 重复性
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26 . EQA即( )
A．室间质量评价
B．室内质控
C．外部质量控制
D．室间质量比对
E．能力验证
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27 . 关于SYBR Green I 的描述，不正确的是：( )
A. 荧光染料的成本低
B. 适用于任何反应体系
C. 操作亦比较简单
D. 特异性强
E. 不需要对引物或探针进行预先特殊的荧光标记
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28 . 提取核酸的质量可以通过下列哪种方法直接判断( )
A. 分光光度法测定
B. 普通PCR分析
C. 实时荧光PCR分析
D. 数字PCR分析
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29 . 缓冲间描述错误的是：( )
A.设置在污染概率不同的实验室区域间的密闭室
B.需要时，设置机械送风/排风系统
C.其门具有互锁功能
D.其门可以同时处于开启状态
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30 . 一般的核酸扩增实验室内配有生物安全柜的是哪个区？( )
A. 试剂准备区
B. 样品制备区
C. 基因扩增区
D. 产物分析区
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31 . PCR测定中的“污染”概念中错误的是：( )
A.标本之间的交叉污染
B.环境中的细菌污染
C.实验室气溶胶污染
D.以前扩增产物的污染
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32. 关于DNA变性的描述不正确的是( )
A. 二级结构破坏
B. 一级结构破坏
C. 黏度降低
D. 生物活性丧失
E. 浮力密度增加
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33 . DNA和RNA共有的成分是( )
A.D核糖
B.D-2-脱氧核糖
C.腺嘌呤
D.尿嘧啶
E.胸腺嘧啶
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34 . 实验结束后，用紫外线照射消除PCR产物污染的原理是 ( )
A. UNG酶水解断裂DNA中的尿嘧啶糖苷键
B. 使同一DNA链上相邻的两个嘧啶之间形成嘧啶二聚体
C. 氧化损伤核酸
D. 与扩增产物的嘧啶碱基形成单加成环丁烷衍生物
E. 使同一DNA链上相邻的两个嘌呤之间形成嘌呤二聚体
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35 . 机械连锁不锈钢传递窗确保试剂和( )在转移过程中不受污染。
A. 物品
B. 酒精
C. 消毒剂
D. 样品
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36 . DNA双螺旋之间氢键断裂，双螺旋解开，DNA分子成为单链，这一过程称( )
A、 变性
B、 复性
C、 扩增
D、 杂交
E、 延伸
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37 . 理想的质控品应具备的条件不包括( )
A.基质与待测样本一致
B. 阳性质控品所含待测物浓度接近试验的决定性水平
C. 靶值或预期结果已知
D. 含有未灭活的传染性病原体
E. 稳定、价廉、同一批次可大量获得
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38 . 如果某临床分子生物学实验室仅采用实时荧光定量 PCR 技术进行检测，其实验室区域可不包括( )
A. 试剂储存和准备区
B. 标本制备区
C. 扩增区
D. 产物分析区
E. 缓冲间
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39. 目前被DNA自动化测序技术广泛采用的酶是:( )
A. 大肠杆菌DNA聚合酶
B. Klenow片段
C. 测序酶
D. 耐热DNA聚合酶
E. 限制性内切核酸酶
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40. 实验室人员培训的主要内容: ( )
A.实验室安全法律、法规
B.实验室安全防范知识
C.相关的专业安全知识
D.废弃物处理、菌种保存、消毒隔离技术等
E.以上都是
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41. 关于反转录PCR的描述，不正确的是( )
A.首先应将RNA转化为cDNA才能进行 PCR
B.除了使用DNA聚合酶外，还应使用反转录酶
C.常用的反转录酶有AMV、MMLV，它们作用的最适温度不同
D.oligo(dT)理论上可以将所有的mRNA进行反转录反应
E.反转录酶不需要引物进行反转录反应
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42.可在二级生物安全实验室开展的新冠病毒相关实验室活动不包括：( )
A.病毒分离
B.标本分装
C.标本灭活
D.核酸检测
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43.室间质量评价的工作流程不包括下列哪项( )
A．接受质控品
B．检查破损
C．按规定日期检测质控品
D．与兄弟实验室对比检测数据
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44. 检测病毒核酸的方法：( )
A. 免疫荧光ELISA
B. 免疫荧光中和实验
C. RT-PCR
D. 组织培养观察CPE中和实验
E. 化学发光
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45. 生物安全实验室中，与确保零泄漏不相关的生物安全设备是：( )
A. 生物安全柜
B. 排风过滤器
C. 高压灭菌器
D. 压枪
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46. 一般的核酸扩增实验室中必须正压的是哪个区？ ( )
A. 试剂准备区
B. 样品制备区
C. 基因扩增区
D. 产物分析区
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47. 下列各种碱基互补形式中，哪种的配对最不稳定( )
A. DNA双链
B. RNA的发夹结构
C. C/G
D. A/T
E. A/U
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48. 下列核酸类型为 RNA 的病毒是( )
A. 巨细胞病毒
B. 单纯疱疹病毒
C. 腺病毒
D. 新型冠状病毒
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49. 阳性质控品失控的原因不包括( )
A. 核酸提取试剂失效
B. 提取的核酸残留有抑制物
C. Tag 酶失活
D. 扩增仪孔间温度不一致
E. 扩增产物污染
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50. 实时荧光PCR仪不可用于( )
A. 拷贝数变异检测
B. HBV DNA定量检测
C. HCV RNA定量检测
D. HPV 分型检测
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51. 单链DNA5’- pCpGpGpTpA-3’能与下列哪种RNA单链分子进行杂交( )
A. 5’ -pGpCpCpTpA-3’
B. 5’-pGpCpCpApU-3’
C. 5’ -pUpApCpCpG-3'
D. 5’-pTpApGpGpC-3’
E. 5’ -pTpUpCpCpAG-3’
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52. 样品制备区一般是：( )
A. 正压的
B. 负压的
C. 正负压均可
D. 以上均是
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53. 下列哪项不是临床分子生物学检验分析前质量控制的内容 ( )
A. 实验室严格分区
B. 定期进行仪器设备的功能检查、维护和校准
C. 所用试剂和耗材的质量符合要求
D. 临床标本的采集、运送和保存符合要求
E．进行核酸提取的有效性评价
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54. 相对于第一代测序技术，下一代测序技术不具有的优点是( )
A. 高通量
B. 并行
C. 模板不需要克隆
D. 较长的测序读长
E. 一次运行可产生海量的高质量数据
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55. 下列灭活病原微生物的方法中属于化学灭活方法的是( )
A. 加热
B. 冷冻
C. 紫外线照射
D. 甲醛熏蒸
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56. DNA 链的Tm 值主要取决于核酸分子的( )
A. A-T 含量
B. C-G 含量
C. A-G 含量
D. T-G含量
E. C-T含量
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57. 新冠病毒核酸检测实验室气流组织宜采用：( )
A. 上送下排
B. 上排下送
C. 高效过滤器排风口不应设在室内被污染风险最高的区域
D. 排风高效过滤装置与排风总管的连接不全是实体风管
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58. 一般的核酸扩增实验室功能区设置分为4个区，分别是试剂准备区、样品制备区、( )和产物分析区。( )
A. 标本接收区
B. 高压灭菌区
C. 基因扩增区
D. 以上均不是
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59. PCR反应常用的缓冲体系为 ( )
A. PBS
B. 柠檬酸
C. 碳酸
D. Tris-HCl
E. 醋酸
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60. 气溶胶是固态或液态微粒悬浮在( )中的分散体系。
A. 气体介质
B. 固体介质
C. 液体介质
D. 空气
二、多选题：（20题，2分/题，共40分）
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61. 应采取哪些措施防止临床基因扩增检验实验室的污染( )
【多选题】
A. 紫外线照射
B. 实验室严格分区
C. 尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG)方法
D. 制定实验室标准操作程序并严格执行
E. 实验结束后用10%次氯酸钠溶液消毒实验台面
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62 . 实时荧光PCR技术用于临床病原体检测的优点是( )
【多选题】
A 可实现定量检测
B 灵敏度高
C 闭管检测污染小
D 操作简便
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63 . 原则上，临床基因组扩增检验室应设置如下哪些工作区域( )
【多选题】
A. 试剂储存和准备区
B. 标本制备区
C. 扩增区
D. 产物分析区
E. 引物设计区
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64 . 临床分子生物学检验中阳性质控样本失控的原因可能为( )
【多选题】
A. 试剂问题
B. 仪器问题
C. 扩增产物污染
D. 核酸提取过程中的随机误差
E. 标本交叉污染
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65 . 核酸检测实验室质量管理的特点是( )
【多选题】
A.技术人员必须具有牢固的“无基因或无核酸”概念
B.建立严格人员进入限制和相关流程
C. 使用合格的仪器设备、试剂和消耗品
D. 以上都不是
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66. 下列灭活病原微生物的方法中属于物理灭活方法的是( )
【多选题】
A. 加热
B. 冷冻
C. 紫外线照射
D. 甲醛熏蒸
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67 . 临床分子生物学检验的分析中质量控制包括 ( )
【多选题】
A. 标本处理
B. 核酸提取
C. 核酸检测
D. 产物分析
E. 临床咨询
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68 . 可能影响到检测精密度的变量有( )
【多选题】
A. 核酸扩增试剂
B. 核酸提取试剂
C. 实验者
D. 实验地点
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69 . 阴性质控品失控的原因可能为( )
【多选题】
A. 扩增产物污染
B. 标本交叉污染
C. 基因组DNA或质粒污染
D. 试剂污染
E. 人为污染
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70 . 病原体核酸扩增检测的假阴性可能的原因有( )
【多选题】
A. 试剂盒质量问题
B. 标本处理不当
C. 抑制物的存在
D. 加样枪污染
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71 . 以下哪种情况下需要做性能验证( )
【多选题】
A． 新开展项目
B． 更换试剂厂家
C． 更换仪器的加样系统
D． 医院过等级评审
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72. 下列哪些物质对PCR反应有抑制作用( )
【多选题】
A. 肝素
B. 血红素
C. dNTP
D. 探针
E. 异丙醇
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73 . 实验过程中如发生标本或试剂外溅，应采取的措施( )
【多选题】
A.立即用5500㎎/L有效氯消毒液滴上
B.滤纸盖上30分钟
C.用75%酒精擦洗
D.用移动紫外灯消毒。
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74 . 做性能验证，实验室条件包括哪些( )
【多选题】
A.仪器的维护保养和校准
B.室内质控
C.试剂、校准品
D.人员
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75. 实验室应制定检验报告单的发放程序，内容应包括检验报告单的( )
【多选题】
A.报告单发放方式
B.发放时间
C.基本格式
D.结果保密措施
E.以上均不是
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76 . 以下属于气溶胶的特点是( )
【多选题】
A. 无色无味、无孔不入，不易发现
B. 传播容易发生病原体在人与人、与动物和动物间的传播
C. 有些微生物气溶胶感染的症状不典型，病程复杂，难以及时诊治，影响预后
D. 不可以远距离传播
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77.临床基因扩增检验实验室设计的原则主要包括( )
【多选题】
A. 分区设置
B. 使用的商品化试剂盒必须获得国家食品药品监督管理局颁发的产品注册登记证
C. 不能使用过期试剂
D. 应对试剂盒进行检测性能评价
E. 控制空气流向
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78. 以下措施可以预防PCR的实验室污染，( )除外
【多选题】
A. 严格区分标本制备区、扩增反应区和产物分析区
B. 设置阴性、阳性和内对照
C．在反应体系中使用dUTP代替dCTP
D. 减少摸板核酸用量
E. 254nm波长紫外线光近距离充分照射
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79. 可能对PCR检测产生干扰的物质包括( )
【多选题】
A. 与待测病原体具有同源性核酸序列的其他病原体；
B. 可能产生相同或相似临床症状的病原体；
C. 治疗过程中的某些药物；
D. 人类基因组DNA。
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80. 污染是PCR实验室 ( )的重要推手
【多选题】
A. 出现假阳性
B. 结果不可信
C. 研发不可靠
D. 以上均不是
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