(二)
实验的预备知识:
(1)绿叶中含有叶绿素,叶绿素等色素分子溶于有机溶剂而不溶于水;
(2)不同色素分子在溶剂中的溶解度和扩散速率不同;
(3)纸条放在溶剂中后,溶剂会沿着纸条向上扩散,即毛细现象;
实验步骤:
(1)称取新鲜叶子5g剪碎,放入研钵中加丙酮5ml,少许碳酸钙(防止叶绿素被破坏)和石英砂(帮助研磨),研磨成匀浆,再加丙酮5ml,然后以漏斗过滤之,即为色素提取液。
(2)取准备好的滤纸条(2×20cm),将其一端剪去两侧,中间留一长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条,并在滤纸剪口上方折叠出一条直线,作为画滤液细线的基准线。
(3)用毛细吸管沾少许滤液在折线上描绘4~5次,注意要画得匀、直、细,每次画完细线要等其自然变干后再画第二根线,然后风干待用。
(4)在大试管中加入层析液,然后将滤纸条固定于软木塞上,插入试管内,使窄端浸入溶剂中(色素线要高于液面,滤纸条边缘不可碰到试管壁),盖紧软木塞,直立于阴暗处进行层析。
(5)当溶剂溶解部分接近滤纸边缘时,取出滤纸风干,观察滤纸上色素带的分布。
实验结果:
纸条上呈现出不同颜色的带状分布,最上端最窄的橙黄色带为胡萝卜素,其次黄色带为叶黄素,再下面最宽的蓝绿色带为叶绿素a,最后的黄绿色带为叶绿素b。